Isi
Alkohol dingin digunakan untuk memisahkan DNA dari larutan berbasis air, memungkinkannya dimurnikan untuk pengujian genetik berikutnya. Menambahkan alkohol ke larutan yang mengandung DNA adalah cara sederhana untuk menjadikannya murni pada suhu yang lebih rendah dan memperlambat enzim yang menurunkannya, memberikan hasil ekstraksi yang lebih baik.
Mematahkan Dinding Sel
Prosedur ekstraksi untuk mendapatkan DNA murni harus menghilangkan semua komponen molekuler dan kimiawi dari jaringan tempat DNA diekstraksi. Langkah pertama melibatkan penghancuran dinding sel. Ini dapat dilakukan dengan berbagai agen kimia yang bersifat kaustik untuk membran sel tetapi tidak merusak DNA. Sel-sel juga dapat disonikasi, dihomogenisasi atau digiling untuk menghancurkan membran.
Menghapus lipid
Setelah dinding sel dihancurkan, deterjen ditambahkan untuk menghilangkan lemak dan minyak yang membentuk membran sel. Deterjen menyebabkan pembubaran minyak dan lemak dalam larutan.
Menghapus protein
Protein dan enzim dapat dicerna dengan menambahkan protease ke dalam larutan. Protease memecah protein menjadi peptida kecil dan asam amino.
DNA yang mengendap
Penambahan alkohol es dingin ke dalam larutan akan mengendapkan dan mengagregasi DNA. Bahan genetik dapat dikumpulkan dengan memusatkan sampel dan mendekantasi lapisan cair. Itu harus ada sebagai sedimen kecil di bagian bawah tabung centrifuge.
Memurnikan DNA
DNA dapat dicuci dengan penangguhan kembali dalam larutan alkohol dingin dan disentrifugasi beberapa kali untuk mendapatkan sampel yang sangat murni. Alkohol khas yang digunakan meliputi etanol dan isopropanol. Proses ini meninggalkan sampel yang sangat murni dalam pengujian yang ketat.
